PCR实验室发生核酸气溶胶污染怎么办

常见的污染的来源

（１）试剂污染 由于在PCR试剂配制过程中，由于加样器、容器、水及其他溶液被核酸污染。

（２）设备污染 半自动核酸提取仪、全自动核酸提取仪在提取过程导致溅洒样本或者核酸模板，污染机器。或者设备内垃圾筒清洁不彻底，残留液体或结晶挥发形成气溶胶对造成污染。

（３）标本交叉污染 可能是由于收集标本的容器被污染，标本放置时由于密封不严溢于容器外，容器外黏有标本，吸样器污染及空气中的气溶胶导致的标本间交叉污染。尤其是病毒类可随气溶胶或形成气溶胶而扩散，导致彼此间的污染。

（４）PCR扩增产物污染 这是PCR中较常见的污染问题，常见于需要在扩增后开盖的检测项目，或者是扩增后产物处理不当，因为PCR产物拷贝量大，远远**PCR检测数个拷贝的极限，所以较微量的PCR产物污染就可形成假阳性。

（５）克隆质粒的污染 在实验室操作中经常会用到阳性参考品，这些阳性参考品大多数是由某些用克隆质粒制作而成，克隆质粒在单位容积内浓度高，不小心使用较易造成污染。有些实验室自己克隆质粒做质控品，配制过程后，垃圾的处理方式不严格等，从而造成质控品对实验室的污染进而造成实验室对标本的污染。

控制污染的措施

（1）实验分区域 合理分隔实验室。将样品的处理、配制PCR反应液、PCR循环扩增及PCR产物的鉴定等步骤分区或分室进行，特别注意标本处理及PCR产物的鉴定应与其他步骤严格分开。较好能划分：标本处理区，PCR反应液制备区，PCR循环扩增区，PCR产物鉴定区。其实验用品及吸样枪应**。实验前应将实验室用紫外线消毒以破坏残留的 DNA 或RNA。

(2) 各区物品不得混用 各个实验区域要对不同设备、物品颜色有明显的标记，如各区域使用专门的工作服、工作鞋、垃圾桶、拖把、抹布、笔等，避免不同工作区域内的设备、物品混用。使用一次性用具吸头、离心管、无粉尘手套、口罩等

（3）设置规范的空调通风系统 尽可能采用全送全排空调系统。在进入各个操作区域需要严格单*向进行，即试剂准备和贮存区→样品制备区→ＰＣＲ扩增区→扩增产物分析区，不得逆行。

（4）污染监测 设立阳性对照、阴性对照，进行重复试验，选择不相同区域的引物进行ＰＣＲ扩增等，做好污染监测，以便采取措施防止和消除污染。

（5）定期实验室清洁 1) 日常清洁：实验前后用PCR Cleaner重点清洁实验台面、**净工作台及仪器表面等*产生核酸污染的区域（可用盒装）。2) 周/月清洁：清洁范围可扩大至：实验室墙面、试剂架、地面、玻璃、门把手及实验服等接触较多的区域（可用桶装）。

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